Preview

Пульмонология

Расширенный поиск
Доступ открыт Открытый доступ  Доступ закрыт Доступ платный или только для Подписчиков

Описание редких аллелей гена CFTR при муковисцидозе с помощью функциональных тестов и форсколинового теста на ректальных органоидах

https://doi.org/10.18093/0869-0189-2021-31-2-178-188

Полный текст:

Аннотация

Муковисцидоз (МВ) – системное наследственное заболевание, обусловленное мутацией гена CFTR и характеризующееся поражением желез внешней секреции, тяжелыми нарушениями функций органов дыхания. Считается, что при «тяжелом» генотипе клинические про- явления более выражены и рано манифестируют. При «мягких» генотипах старт клинических проявлений может быть отсрочен.

Материалы и методы. Проведен анализ историй болезни пациентов (n = 2) с МВ без клинических проявлений, наблюдаемых в российских центрах МВ. Для определения разности кишечных потенциалов (ОРКП) и форсколинового теста на кишечных органоидах использовался биопсийный материал прямой кишки. ДНК для секвенирования выделялась из лейкоцитов венозной крови.

Результаты. При обследовании у 1-й пациентки (девочка 12 лет) установлен генотип F508del/c.1584+18672A>G, у 2-го (мальчик 3 лет) – F508del/G509D-E217G. Диагноз установлен на основании неонатального скрининга. Методом ОРКП выявлена сниженная функция CFTR-канала (плотность тока короткого замыкания (ΔISC) на форсколин у 1-й пациентки – 12,33 ± 2,35, у 2-го пациента – 25,00 ± 3,37 μA / см2, ответ на карбахол и гистамин в отрицательную сторону отражает вход ионов калия в клетки, что характерно для МВ. По данным форсколинового теста на кишечных органоидах показано, что количество функционального белка на апикальной мембране кишечного эпителия увеличивается при действии как потенциатора, так и корректора у обоих пациентов. Наибольший эффект наблюдается при совместном применении потенциатора VX-770 и корректора VX-809.

Заключение. Функциональный тест ОРКП и форсколиновый тест на кишечных органоидах являются чувствительными методами определения остаточной функциональной активности канала CFTR и позволяют уточнить диагноз в сложных случаях. Изученные генетические варианты c.1584+18672A>G и G509D-E217G относятся к мутациям IV–VI класса, клиническая картина соответствует проявлениям «мягких» мутаций. Пациенты продолжают наблюдаться в российских центрах МВ.

Об авторах

А. С. Ефремова
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Медико-генетический научный центр имени академика Н.П.Бочкова»
Россия

Ефремова Анна Сергеевна – к. б. н., старший научный сотрудник лаборатории генетики стволовых клеток.

115478, Россия, Москва, ул. Москворечье, 1; тел.: (495) 324-20-24


Конфликт интересов:

Конфликт интересов авторами не заявлен



Ю. Л. Мельяновская
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Медико-генетический научный центр имени академика Н.П.Бочкова»
Россия

Мельяновская Юлия Леонидовна – научный сотрудник научно-клинического отдела муковисцидоза.

115478, Россия, Москва, ул. Москворечье, 1; тел.: (495) 324-20-24


Конфликт интересов:

Конфликт интересов авторами не заявлен



Н. В. Булатенко
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Медико-генетический научный центр имени академика Н.П.Бочкова»
Россия

Булатенко Наталья Вадимовна – младший научный сотрудник лаборатории генетики стволовых клеток.

115478, Россия, Москва, ул. Москворечье, 1; тел.: (495) 324-20-24


Конфликт интересов:

Конфликт интересов авторами не заявлен



Н. Д. Одинаева
Государственное бюджетное учреждение здравоохранения Московской области «Детский клинический многопрофильный центр Московской области»
Россия

Одинаева Нисо Джумаевна – д. м. н., профессор, главный врач.

141009, Россия, Московская область, Мытищи, ул. Коминтерна, 24А, стр. 1; тел.: (499) 237-02-23


Конфликт интересов:

Конфликт интересов авторами не заявлен



А. В. Орлов
Санкт-Петербургское государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Детская городская больница святой Ольги»
Россия

Орлов Александр Владимирович – к. м. н., заведующий 3-м инфекционным отделением.

194156, Россия, Санкт-Петербург, ул. Земледельческая, 2; тел.: (812) 295-69-98


Конфликт интересов:

Конфликт интересов авторами не заявлен



А. А. Пашкевич
Санкт-Петербургское государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Детская городская больница святой Ольги»
Россия

Пашкевич Александр Анатольевич – врач-пульмонолог, педиатр 3-го инфекционного отделения.

194156, Россия, Санкт-Петербург, ул. Земледельческая, 2; тел.: (812) 295-69-98


Конфликт интересов:

Конфликт интересов авторами не заявлен



Т. А. Адян
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Медико-генетический научный центр имени академика Н.П.Бочкова»; Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И.Пирогова» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Россия

Адян Тагуи Аветиковна – к. м. н., научный сотрудник лаборатории ДНК-диагностики; доцент кафедры общей и медицинской генетики медико-биологического факультета.

115478, Россия, Москва, ул. Москворечье, 1; 117997, Россия, Москва, ул. Островитянова, 1; тел.: (499) 324-87-72


Конфликт интересов:

Конфликт интересов авторами не заявлен



Е. И. Кондратьева
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Медико-генетический научный центр имени академика Н.П.Бочкова»; Государственное бюджетное учреждение здравоохранения Московской области «Детский клинический многопрофильный центр Московской области»
Россия

Кондратьева Елена Ивановна – д. м. н., профессор, заведующая научно-клиническим отделом муковисцидоза; руководитель центра муковисцидоза.

115478, Россия, Москва, ул. Москворечье, 1; 141009, Россия, Московская область, Мытищи, ул. Коминтерна, 24А, стр. 1; тел.: (495) 324-20-24


Конфликт интересов:

Конфликт интересов авторами не заявлен



Список литературы

1. Кондратьева Е.И., Каширская Н.Ю., Капранов Н.И., ред. Национальный консенсус «Муковисцидоз: определение, диагностические критерии, терапия». М.: Боргес; 2018.

2. Marson F.A.L., Bertuzzo C.S., Ribeiro J.D. Classification of CFTR mutation classes. Lancet Respir. Med. 2016; 4 (8): е37–38. DOI: 10.1016/S2213-2600(16)30188-6.

3. De Boeck K. Cystic fibrosis in the year 2020: A disease with a new face. Acta Paediatr. 2020; 109 (5): 893–899. DOI: 10.1111/APA.15155.

4. Кистозный фиброз (муковисцидоз): клинические рекомендации. 2020. Доступно на: http://cr.rosminzdrav.ru/schema/372

5. Derichs N., Sanz J., Von Kanel T. et al. Intestinal current measurement for diagnostic classification of patients with questionable cystic fibrosis: validation and reference data. Thorax. 2010; 65 (7): 594–599. DOI: 10.1136/THX.2009.125088.

6. Мельяновская Ю.Л., Кондратьева Е.И., Куцев С.И. Определение референтных значений для метода определения разности кишечных потенциалов в Российской Федерации. Медицинский вестник Северного Кавказа. 2020; 15 (2): 162–165. DOI: 10.14300/MNNC.2020.15039.

7. Dekkers J.F., van der Ent C.K., Beekman J.M. Novel opportunities for CFTR-targeting drug development using organoids. Rare Dis. 2013; 1 (1): e27112. DOI: 10.4161/rdis.27112.

8. Dekkers J.F., Berkers G., Kruisselbrink E. et al. Characterizing responses to CFTR-modulating drugs using rectal organoids derived from subjects with cystic fibrosis. Sci. Transl. Med. 2016; 8 (344): 344ra84. DOI: 10.1126/scitranslmed.aad8278.

9. Boj S.F., Vonk A.M., Statia M. et al. Forskolin-induced swelling in intestinal organoids: an in vitro assay for assessing drug response in cystic fibrosis patients. J. Vis. Exp. 2017; (120): е55159. DOI: 10.3791/55159.

10. Vonk A.M., van Mourik P., Ramalho A.S. et al. Protocol for application, standardization and validation of the forskolin-induced swelling assay in cystic fibrosis human colon organoids. STAR Protoc. 2020; 1 (1): 100019. DOI: 10.1016/J.XPRO.2020.100019.

11. Кондратьева Е.И., Мельяновская Ю.Л., Ефремова А.С. и др. Опыт применения методов оценки функциональности анионного канала CFTR у пациентов с установленным и предполагаемым диагнозом муковисцидоза. Сибирское медицинское обозрение. 2019; (2): 60–69. DOI: 10.20333/2500136-2019-2-60-69.

12. Costantino L., Rusconi D., Soldà G. et al. Fine characterization of the recurrent c.1584+18672A>G deep-intronic mutation in the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator gene. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 2013; 48 (5): 619–625. DOI: 10.1165/rcmb.2012-0371OC.

13. Амелина Е.Л., Каширская Н.Ю., Кондратьева Е.И. и др., ред. Регистр больных муковисцидозом в Российской Федерации. 2018 год. М.: Медпрактика-М; 2020. Доступно на: https://mukoviscidoz.org/doc/registr/web_block_Registre_2018.pdf

14. Кондратьева Е.И., Мельяновская Ю.Л., Петрова Н.В. и др. Клинико-генетическая характеристика больных муковисцидозом и функциональная оценка работы хлорного канала с впервые описанным патогенным вариантом D579Y (c.1735G>T). Медицинский вестник Северного Кавказа. 2020; 15 (2): 166–169. DOI: 10.14300/mnnc.2020.15040.

15. Southern K.W., Patel S., Sinha I.P., Nevitt S.J. Correctors (specific therapies for class II CFTR mutations) for cystic fibrosis. Cochrane Database Syst. Rev. 2018; 8 (8): CD010966. DOI: 10.1002/14651858.CD010966.pub2.

16. Stanojevic S., Davis S.D., Retsch-Bogart G. et al. Progression of lung disease in preschool patients with cystic fibrosis. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2017; 195 (9): 1216–1225. DOI: 10.1164/rccm.201610-2158OC.


Для цитирования:


Ефремова А.С., Мельяновская Ю.Л., Булатенко Н.В., Одинаева Н.Д., Орлов А.В., Пашкевич А.А., Адян Т.А., Кондратьева Е.И. Описание редких аллелей гена CFTR при муковисцидозе с помощью функциональных тестов и форсколинового теста на ректальных органоидах. Пульмонология. 2021;31(2):178-188. https://doi.org/10.18093/0869-0189-2021-31-2-178-188

For citation:


Efremova A.S., Melyanovskaya Yu.L., Bulatenko N.V., Odinaeva N.D., Orlov A.V., Pashkevich A.A., Adyan T.A., Kondratyeva E.I. Description of rare alleles of the CFTR gene in cystic fibrosis using functional tests and forskolin-induced swelling assay in rectal organoids. PULMONOLOGIYA. 2021;31(2):178-188. (In Russ.) https://doi.org/10.18093/0869-0189-2021-31-2-178-188

Просмотров: 62


ISSN 0869-0189 (Print)
ISSN 2541-9617 (Online)