Применение методов ELISA и иммуноблота для выявления аутоантител против рековерина в сыворотке крови больных мелкоклеточной карциномой легких
Аннотация
К паранеопластическим (онконевральным) антигенам относят белки, которые в норме высокоспецифичны для нервной системы, но при злокачественной трансформации могут экспрессироваться также клетками раковой опухоли, локализованными вне нервной системы. При попадании в кровяное русло паранеопластические антигены инициируют аутоиммунный процесс, в результате чего генерируются аутоантитела, которые, преодолевая гематотканевый барьер, вызывают развитие паранеопластического неврологического синдрома. Один из паранеопластических антигенов — Са2+-связывающий белок рековерин — может экспрессироваться клетками некоторых опухолей и тем самым индуцировать аутоиммунный процесс, приводя в конечном счете к развитию аутоиммунной дегенерации сетчатки. В этой работе мы провели сравнение применения методов ELISA и иммуноблота для определения аутоантител против рековерина в сыворотке крови больных раком легких и показали, что метод ELISA неспецифичен, в то время как иммуноблот обладает необходимыми специфичностью и чувствительностью, достаточными для серийного анализа сыворотки крови больных раком легких на присутствие в них аутоантител против рековерина.
При поддержке: Работа поддержана грантами Ludw ig Institute for Cancer Research, РФФИ (№ 00-0448332) и Федеральной программы "Интеграция"
Об авторах
А. В. Бажин
НИИ физико-химической биологии им. А.Н.Белозерского МГУ;
Институт пульмонологии Минздрава РФ
Россия
Россия
Москва
О. Н. Шифрина
НИИ физико-химической биологии им. А.Н.Белозерского МГУ;
Институт пульмонологии Минздрава РФ
Россия
Россия
Москва
М. С. Савченко
НИИ физико-химической биологии им. А.Н.Белозерского МГУ;
Институт пульмонологии Минздрава РФ
Россия
Россия
Москва
Н. К. Тихомирова
НИИ физико-химической биологии им. А.Н.Белозерского МГУ;
Институт пульмонологии Минздрава РФ
Россия
Россия
Москва
А. Г. Чучалин
НИИ физико-химической биологии им. А.Н.Белозерского МГУ;
Институт пульмонологии Минздрава РФ
Россия
Россия
Москва
Список литературы
1. Дижур Л.М ., Некрасова Э.Н., Филиппов П.П. Новый специфичный для фоторецепторных клеток белок с молекулярной массой 26 кДа, способный связываться с иммобилизованным делипидизированным родопсином. Биохимия 1991; 56 (9): 225-229.
2. Adamus G., Amundson D. Epitope recognition of recoverin in cancer associated retiniopathy: evidence for calcium-dependent conformational epitopes. J. Neurosci. Res. 1996; 45 (6): 863-872.
3. Gorodovikova E.N., Philippov P.P. The presence of a calciumsensitive p26-containing complex in bovine retina rod cells. FEBS Lett. 1993; 335 (2): 277-279.
4. Gorodovikova E.N., Senin I.I., Philippov P.P. Calcium-sensitive control of rhodopsin phosphorylation in the reconstituted system consisting of photoreceptor membranes, rhodopsin kinase and recoverin. Ibid. 1994; 353 (2): 171-172.
5. Gure A.O., Stockert E., Scanlan M.J. et al. Serological identification of embryonic neural proteins as highly immunogenic tumor antigens in small cell lung cancer. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2000; 97 (8): 4198-4203.
6. Kawamura S., Hisatomi O., Kayada S. et al. Recoverin has S-modulin activity in frog rods. J. Biol. Chem. 1993; 268 (20): 14579-14582.
7. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature 1970; 227: 680-688.
8. Maeda A., Ohguro H., Maeda T. et al. Aberrant expression of photoreceptor-specific calcium-binding protein (recoverin) in cancer cell lines. Cancer Res. 2000; 60 (7): 1914-1920.
9. Polans A .S., Buczylko J., Crabb J., Palczewski K. A photoreceptor calcium binding protein is recognized by autoantibodies obtained from patients with cancer-associated retinopathy. J. Cell Biol. 1991; 112 (5): 981-989.
10. Polans A .S., Witkowska D., Haley T.L. et al. Recoverin, a photoreceptor-specific calcium-binding protein, is expressed by the tumor of a patient with cancer-associated retinopathy. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1995; 92 (20): 9176-9180.
11. Senin I.I., Zargarov A .A ., Alekseev A M . et al. N-Myristoylation of recoverin enhances its efficiency as an inhibitor of rhodopsin kinase. FEBS Lett. 1995; 376 (1-2): 87-90.
Рецензия
Для цитирования:
Бажин А.В., Шифрина О.Н., Савченко М.С., Тихомирова Н.К., Чучалин А.Г. Применение методов ELISA и иммуноблота для выявления аутоантител против рековерина в сыворотке крови больных мелкоклеточной карциномой легких. Пульмонология. 2003;(3):62-65.
For citation:
Bazhin A.V., Shifrina O.N., Savchenko M.S., Tikhomirova N.K., Chuchalin A.G. Application of ELISA and immunoblotting methods for detection of anti-recoverin autoantibodies in sera of small-cell lung carcinoma patients. PULMONOLOGIYA. 2003;(3):62-65. (In Russ.)
Просмотров:
242
Послать статью по эл. почте 