pulmoПульмонологияPULMONOLOGIYA0869-01892541-9617Scientific and Practical Journal “PULMONOLOGIYA” LLCpulmo-3949Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯORIGINAL STUDIESАТФ-деградирующая активность мембран легочной ткани: исследование особенностей гидролиза, клеточной специфичности и локализацииATP-degrading activity membranes from lung tissue: peculiarities of hydrolisis cellular specificity and localizationНюпенкоЕ. В.NupenkoE. V.

Отдел клеточной биологии.

ПанченкоМ. П.PanchenkoM. P.

Отдел клеточной биологии.

РомановЮ. А.RomanovYu. A.

Лаборатория молекулярной эндокринологии.

ГришинА. В.GrishinA. V.

Отдел клеточной биологии.

КабаеваН. В.KabaevaN. V.

Лаборатория молекулярной эндокринологии.

АнтоновА. С.AntonovA. S.

Лаборатория молекулярной эндокринологии.

ТкачукВ. А.TkachukV. A.

Отдел клеточной биологии.

Кардиологический научный центр РоссииRussian Federation199204052022045360Copyright © Нюпенко Е.В., Панченко М.П., Романов Ю.А., Гришин А.В., Кабаева Н.В., Антонов А.С., Ткачук В.А., 20222022Нюпенко Е.В., Панченко М.П., Романов Ю.А., Гришин А.В., Кабаева Н.В., Антонов А.С., Ткачук В.А.Nupenko E.V., Panchenko M.P., Romanov Y.A., Grishin A.V., Kabaeva N.V., Antonov A.S., Tkachuk V.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.pulmonology.ru/pulm/article/view/3949

Исследованы особенности деградации АТФ и АДФ под действием мембран легких. Показано, что гидролиз АТФ протекает с образованием конечного продукта реакции АМФ. Образование АМФ из АТФ происходит за счет последовательного отщепления терминального фосфата согласно схеме: АТФ ─ ─→АДФ ─ ─→АМФ, а не за счет пирофосфатазной активности.

Ингибиторный анализ с использованием адениловых нуклеотидов, их негидролизуемых аналогов, фосфата и пирофосфата, а также определение кинетических параметров АТФ-азной и АДФ-азной реакций указывает на согласованное протекание стадий гидролиза АТФ.

АТФ-деградирующая активность обнаружена в мембранах клеток, формирующих сосуды (эндотелиальных и гладкомышечных) и не обнаружена в мембранах альвеолоцитов II порядка — клетках альвеол, секретирующих сурфактант.

Данная нуклеотид-гидролизующая активность локализована преимущественно на внешней стороне плазматической мембраны клетки, поскольку добавление порообразующего антибиотика аламетицина к нативному монослою эндотелия незначительно увеличивало скорость гидролиза АТФ.

Peculiarities of ATP and ADP degradation by lung membranes were studed. It was shown that AMP is the final product of ATP hydrolysis. AMP is formed from ATP by sequential release of terminal phosphate according to the scheme: ATP─ ─→ADP─ ─→AMP, and not by pyrophosphatase activity.

Inhibitory analysis using adenine nucleotides, their nonhydrolysible analogs, phosphate and pyrophosphate and also determination of kinetic values (Kni and Vmax) for the ATP-ase and ADP-ase reactions indicates on a coordinated hydrolysis of ATP and ADP.

ATP-degradating activity is discovered in membranes of cells formed a blood vessels (endothelial and smooth-muscle), but not in membranes of Type II alveolar cells, which secrete surfactant.

This nucleotide hydrolising activity is preferentially localised on a luminal surfase of plasma membrane, since addition of a pore-forming antibiotic alameticine to a confluent endothelial monolayer does not significantly increase the ATP hydrolysis.

Авторы статьи выражают глубокую благодарность младшему научному сотруднику кафедры биохимии МГУ им. М.В. Ломоносова М.В. Панченко за оказанную помощь в проведении экспериментов.ReferencesВасильева Е. А., Панченко М. В., Виноградов А. Д. // Биохимия.— 1989.— Т. 54.— С. 1490—1498.Васильева Е. А., Панченко М. В., Виноградов А. Д. // Биохимия.— 1989.— Т. 54.— С. 1490—1498.Antonov A. S., Nicolaeva М. A., Klueva Т. S., Romanov Yu. A., Babaev V. R., Bystrevskaya V. В., Perov N. A., Repin V. S., Smirnov V. N. // Atherosclerosis.— 1986.—Vol. 83.— P. 1 — 19.Antonov A. S., Nicolaeva М. A., Klueva Т. S., Romanov Yu. A., Babaev V. R., Bystrevskaya V. В., Perov N. A., Repin V. S., Smirnov V. N. // Atherosclerosis.— 1986.—Vol. 83.— P. 1 — 19.Antonov A. S., Lukashev М. E., Romanov Yu. A., Tkachuk V. A., Repin V. S., Smirnov V. N. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.— 1986.— Vol. 83.— P. 9704— 9708.Antonov A. S., Lukashev М. E., Romanov Yu. A., Tkachuk V. A., Repin V. S., Smirnov V. N. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.— 1986.— Vol. 83.— P. 9704— 9708.Berne R. М, Foley D. H., Watkinson W. P., Miller W. L., Winn R., Rubio R. // Physiological and Regulatory Functions of Adenosine and Adenine Nucleotides // Eds. H. P. Baer, J. I. Drummond.— New York: Raven Press, 1979.— P. 117—126.Berne R. М, Foley D. H., Watkinson W. P., Miller W. L., Winn R., Rubio R. // Physiological and Regulatory Functions of Adenosine and Adenine Nucleotides // Eds. H. P. Baer, J. I. Drummond.— New York: Raven Press, 1979.— P. 117—126.Chance B., Nishimura M. // Meth. Enzymol.— 1967.— Vol. 10.— P. 641—650.Chance B., Nishimura M. // Meth. Enzymol.— 1967.— Vol. 10.— P. 641—650.Chellian R., Bakhle Y. S. // Q. J. Exp. Physiol.— 1983.— Vol. 68.— P. 289-300.Chellian R., Bakhle Y. S. // Q. J. Exp. Physiol.— 1983.— Vol. 68.— P. 289-300.Chesterman C. N., Ager A., Gordon J. L. // J. Cell. Physiol.— 1983.— Vol. 116.— P. 45—50.Chesterman C. N., Ager A., Gordon J. L. // J. Cell. Physiol.— 1983.— Vol. 116.— P. 45—50.Clemens M. G., Forrester T. // J. Physiol. (Lond).— 1981.—Vol. 312.— P. 143—158.Clemens M. G., Forrester T. // J. Physiol. (Lond).— 1981.—Vol. 312.— P. 143—158.Crutchley D. J., EUng Т. E., Anderson M. W. // Life Sci.— 1978.—Vol. 22.— P. 1413—1420.Crutchley D. J., EUng Т. E., Anderson M. W. // Life Sci.— 1978.—Vol. 22.— P. 1413—1420.Cusack N. Y., Pearson J. D., Gordon 1. L. // Biochem. J.— 1983.—Vol. 214.— P. 975—981.Cusack N. Y., Pearson J. D., Gordon 1. L. // Biochem. J.— 1983.—Vol. 214.— P. 975—981.Hayes L. W., Goguen C. F., Stevens A. L., Margargal W. W, Slakey L. L. // Proc. Natl. Acad. Sei. USA.— 1979.— Vol. 76.— P. 2532—2535.Hayes L. W., Goguen C. F., Stevens A. L., Margargal W. W, Slakey L. L. // Proc. Natl. Acad. Sei. USA.— 1979.— Vol. 76.— P. 2532—2535.Hellewell P. G, Pearson J. D. // Pulmonary Endothelium in Health and Disease / Ed. U. S. Ryan.— New York, 1987.— P. 327—348.Hellewell P. G, Pearson J. D. // Pulmonary Endothelium in Health and Disease / Ed. U. S. Ryan.— New York, 1987.— P. 327—348.Jaffe E. A., Nachman R. L., Becker C. G., Minick C. R. // J. Clin. Invest.— 1973.—Vol. 52.—P. 2745—2756.Jaffe E. A., Nachman R. L., Becker C. G., Minick C. R. // J. Clin. Invest.— 1973.—Vol. 52.—P. 2745—2756.Maack T, Suzuki M, Almeida F. A., Nusseneweig D., Scarboro R, McEnroe G. A., Lewitski J. A. // Science.— 1987.—Vol. 238.—P. 675—678.Maack T, Suzuki M, Almeida F. A., Nusseneweig D., Scarboro R, McEnroe G. A., Lewitski J. A. // Science.— 1987.—Vol. 238.—P. 675—678.Maciag T, Cer undo J., Ilsley S, Kelly P. R., Forand R. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.— 1979.— Vol. 76.— P. 5674— 5676.Maciag T, Cer undo J., Ilsley S, Kelly P. R., Forand R. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.— 1979.— Vol. 76.— P. 5674— 5676.Nupenko E. V., Panchenko M. P., Starikova M. G., Grishin A. V., Trachuk V. A. // Biochim. Biophys. Acta.— 1991.—Vol. 1091.—P. 213—221.Nupenko E. V., Panchenko M. P., Starikova M. G., Grishin A. V., Trachuk V. A. // Biochim. Biophys. Acta.— 1991.—Vol. 1091.—P. 213—221.Pearson J. D., Gordon J. L. // Biology of Endothelial Cells / Ed. E. A. Jaffe.— -Bobiton: Martinus Nijhoff Publ, 1974.— P. 331—342.Pearson J. D., Gordon J. L. // Biology of Endothelial Cells / Ed. E. A. Jaffe.— -Bobiton: Martinus Nijhoff Publ, 1974.— P. 331—342.Pearson J. D., Gordon J. L. // Nature.— 1979—. Vol. 981.— P. 384—386.Pearson J. D., Gordon J. L. // Nature.— 1979—. Vol. 981.— P. 384—386.Pearson J. D., Carleton J. S., Gordon J. L. // Biochem. J — 1980.— Vol. 190.— P. 421—429.Pearson J. D., Carleton J. S., Gordon J. L. // Biochem. J — 1980.— Vol. 190.— P. 421—429.Pearson J. D., Gordon J. L. // Annu. Rev. Physiol — 1985.—Vol. 47.— P. 617—627.Pearson J. D., Gordon J. L. // Annu. Rev. Physiol — 1985.—Vol. 47.— P. 617—627.Peterson G. L. // Anal. Biochem.— 1977.— Vol. 83 — P. 346—356.Peterson G. L. // Anal. Biochem.— 1977.— Vol. 83 — P. 346—356.Ryan J. W., Roblero J., Steward J. M. // Biochem. J — 1988.— Vol. 110.— P. 795—797.Ryan J. W., Roblero J., Steward J. M. // Biochem. J — 1988.— Vol. 110.— P. 795—797.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.