pulmoПульмонологияPULMONOLOGIYA0869-01892541-9617Scientific and Practical Journal “PULMONOLOGIYA” LLC10.18093/0869-0189-2014-0-3-73-77pulmo-390Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯORIGINAL STUDIESВИРУЛЕНТНЫЕ СВОЙСТВА ГРИБОВ РОДА CANDIDA У ПАЦИЕНТОВ С ПЕРСИСТИРУЮЩЕЙ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ, ДЛИТЕЛЬНО ПРИМЕНЯЮЩИХ ИНГАЛЯЦИОННЫЕ СТЕРОИДЫVIRULENT PROPERTIES OF GENUS CANDIDA IN PATIENTS WITH PERSISTENT BRONCHIAL ASTHMA AND LONG-TERM TREATMENT WITH INHALED STEROIDSРешетниковаИ. Д.ReshetnikovaI. D.

к. м. н., доцент, зам. директора по научной и лечебной работе ФБУН КНИИЭМ Роспотребнадзора; тел.:(843) 236-67-21

reshira@mail.ruТюринЮ. А.TyurinYu. A.

к. м. н., зав. лабораторией иммунологии и разработки аллергенов ФБУН "КНИИЭМ" Роспотребнадзора; ассистент кафедры биологической химии ГБОУ ВПО "КГМУ" МЗ России;тел.: (843) 238-99-79

immunolab@yandex.ruГлушкоН. И.GlushkoN. I.

ст. научный сотрудник лаборатории микологии ФБУН "КНИИЭМ" Роспотребнадзора; тел.: (843) 236-56-59

mycology-kazan@yandex.ruЛисовскаяС. А.LisovskayaS. A.

к. б. н., ст. научный сотрудник лаборатории микологии ФБУН "КНИИЭМ" Роспотребнадзора; тел.: (843)236-56-59

mycology-kazan@yandex.ruМустафинИ. Г.MustafinI. G.

д. м. н., профессор, зав. кафедры биологической химии ГБОУ ВПО "КГМУ" Ммнздрава России; тел.: (843) 238-99-79

immunolab@yandex.ruФассаховР. С.FassakhovR. S.

д. м. н., профессор, директор ФБУН "КНИИЭМ" Роспотребнадзора; тел.: (843) 236-67-21

farrus@mail.ruФБУН "Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека: 420015, Республика Татарстан, Казань, ул. Большая Красная, 67РоссияFederal Institution Kazan Research Institute of Epidemiology and Microbiology; Kazan, RussiaRussian FederationФБУН "Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека: 420015, Республика Татарстан, Казань, ул. Большая Красная, 67 ГБОУ ВПО "Казанский государственный медицинский университет" Минздрава России: 420012, Республика Татарстан, Казань, ул. Бутлерова, 49РоссияFederal Institution Kazan Research Institute of Epidemiology and Microbiology; Kazan, Russia State Institution Kazan State Medical University, the Health Ministry of Russia; Kazan, RussiaRussian FederationГБОУ ВПО "Казанский государственный медицинский университет" Минздрава России: 420012, Республика Татарстан, Казань, ул. Бутлерова, 49РоссияState Institution Kazan State Medical University, the Health Ministry of Russia; Kazan, RussiaRussian Federation201428062014037377Copyright © Решетникова И.Д., Тюрин Ю.А., Глушко Н.И., Лисовская С.А., Мустафин И.Г., Фассахов Р.С., 20142014Решетникова И.Д., Тюрин Ю.А., Глушко Н.И., Лисовская С.А., Мустафин И.Г., Фассахов Р.С.Reshetnikova I.D., Tyurin Y.A., Glushko N.I., Lisovskaya S.A., Mustafin I.G., Fassakhov R.S.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.pulmonology.ru/pulm/article/view/390

Протеолитические свойства грибов рода Candida, колонизирующих слизистые и составляющих основной компонент микробиоценоза у пациентов с персистирующей бронхиальной астмой (БА), длительно применяющих ингаляционные глюкокортикостероиды (иГКС), изучены недостаточно. В настоящей работе изучались вирулентные свойства штаммов грибов рода Candida spp., выделенных из микобиоты зева у пациентов с БА, длительно применяющих иГКС. У пациентов с персистирующей БА (n = 30), принимающих средние и высокие дозы иГКС ³ 1 года, проводилось микологическое исследование слизистых зева; группу сравнения составили пациенты с БА, не принимающие иГКС (n = 15). Грибы и бактерии идентифицировались общепринятыми методами (морфология, наличие трубок прорастания, хламидоспор, ферментация углеводов). Антибиотикограмма определялась методом дисков на агаризованной среде Сабуро. Уровень адгезии определялся на разработанной модели с применением нитроцеллюлозной пленки с иммобилизованным гемоглобином. Протеиназная активность в супернатанте определялась иммуноферментным способом при 2 значениях рН среды: кислой (рН = 4,5) и слабощелочной (pH = 7,8). Протеолиз CD клеточных лейкоцитарных рецепторов осуществлялся с применением цитофлуорометрического метода. Частота встречаемости грибковой колонизации зева у больных БА, постоянно применяющих иГКС, составила 76,7 %. Большинство этих штаммов характеризуются выраженными вирулентными свойствами (высокой адгезивностью и ферментативной активностью) и множественной устойчивостью к антимикотикам, что статистически достоверно выше, чем в группе сравнения. Способность данных штаммов секретировать ферменты, вызывающие протеолиз поверхностных у CD4+-рецепторов T-лимфоцитов, обеспечивает дополнительный механизм развития иммуномодулирующего действия Candida albicans в системе местного иммунитета при развитии инвазивной инфекции.

Aim. The aim of this study was to investigate virulent properties of the genus Candida spp. in patients with persistent bronchial asthma and long-term treatment with inhaled steroids.Methods. In this study, virulent properties of the genus Candida spp. were investigated in oropharyngeal smears of 30 patients with persistent asthma treated with moderate-to-high dose inhaled corticosteroids (ICS) for at least 1 year. A control group included 15 steroid-naive asthmatic patients. Fungi were identified by conventional methods (morphology, presence of germination tubes, chlamydospores, fermentation of carbohydrates). Sensitivity to antibiotics was determined by disk method on the Saburo agar medium. Adhesion was assessed in a model with nitrocellulose film and immobilized hemoglobin. Proteinase activity was measured by the ELISA method in supernatant at two pH values: acidic (pH = 4.5) or weakly alkaline(pH = 7.8). CD cell leukocyte receptor proteolysis was evaluated by the cytofluorometrics method.Results. An incidence of fungal colonization of the pharynx in ICS-treated patients with bronchial asthma was 76.7 %. Most strains were highly virulent as they had significantly higher adhesive and enzymatic activity and multi-drug resistance to antifungals compared to control group.Conclusion. The ability of these strains to secrete proteolytic enzymes against CD4+ T-lymphocyte surface receptors could provide an additional immunomodulatory mechanism in Candida albicans invasion.

Candida albicansингаляционные глюкокортикостероидыбронхиальная астмаферментыbronchial asthmainhaled corticosteroidsCandida albicansproteolytic enzymesReferencesBuhl R. Local oropharyngeal side effects of inhaled corticosteroids in patients with asthma. Allergy. 2006; 61: 518–526.Buhl R. Local oropharyngeal side effects of inhaled corticosteroids in patients with asthma. Allergy. 2006; 61: 518–526.Roland J.N., Bhalla R.K., Earis J. The local side effects of inhaled corticosteroids: current understanding and review of the literature. Chest. 2004; 126: 213–219.Roland J.N., Bhalla R.K., Earis J. The local side effects of inhaled corticosteroids: current understanding and review of the literature. Chest. 2004; 126: 213–219.Salzman G.A., Pyszczynski D.R. Oropharyngeal candidiasis in patients treated with beclomethasonedipropionate delivered by metered dose inhaler alone and with aerochamber. J. Allergy Clin. Immunol. 1988; 81: 424–428.Salzman G.A., Pyszczynski D.R. Oropharyngeal candidiasis in patients treated with beclomethasonedipropionate delivered by metered dose inhaler alone and with aerochamber. J. Allergy Clin. Immunol. 1988; 81: 424–428.Adams N.P., Bestall J.C., Jones P.W.et al. Inhaled fluticasone at different doses for chronic asthma in adults and children. Cochrane Database Syst. Rev. 2005; 20; (3): CD003534.Adams N.P., Bestall J.C., Jones P.W.et al. Inhaled fluticasone at different doses for chronic asthma in adults and children. Cochrane Database Syst. Rev. 2005; 20; (3): CD003534.Сергеев А.Ю., Сергеев Ю.В. Грибковые инфекции. Руководство для врачей. 2 изд. М.: Издательство "БИНОМ"; 2008. / Sergeev A.Yu., Sergeev Yu.V. Fungal Infections: Practical Guidelines. [Gribkovye infektsii. Rukovodstvo dlya vrachey]. 2nd ed. Moscow: BINOM; 2008 (in Russian).Сергеев А.Ю., Сергеев Ю.В. Грибковые инфекции. Руководство для врачей. 2 изд. М.: Издательство "БИНОМ"; 2008. / Sergeev A.Yu., Sergeev Yu.V. Fungal Infections: Practical Guidelines. [Gribkovye infektsii. Rukovodstvo dlya vrachey]. 2nd ed. Moscow: BINOM; 2008 (in Russian).Kurta E., Yildirima H., Kirazb N. et al. Erginela Oropharyngeal candidiasis with dry-powdered fluticasonepropionate: 500 mg / day versus 200 mg / day. Allergol. Immunol. Pathol. 2008; 36 (1): 17–20.Kurta E., Yildirima H., Kirazb N. et al. Erginela Oropharyngeal candidiasis with dry-powdered fluticasonepropionate: 500 mg / day versus 200 mg / day. Allergol. Immunol. Pathol. 2008; 36 (1): 17–20.Лисовская С.А., Глушко Н.И., Халдеева Е.В. Адгезивные свойства штаммов Candida albicans при кандидозах различной локализации. Проблемы медицинской микологии. 2007; 9 (1): 26–29. / Lisovskaya S.A., Glushko N.I., Khaldeeva E.V. Adhesive properties of Candida albicans strains in candidosis of different sites. Problemy meditsinskoy mikologii. 2007; 9 (1): 26–29 (in Russian).Лисовская С.А., Глушко Н.И., Халдеева Е.В. Адгезивные свойства штаммов Candida albicans при кандидозах различной локализации. Проблемы медицинской микологии. 2007; 9 (1): 26–29. / Lisovskaya S.A., Glushko N.I., Khaldeeva E.V. Adhesive properties of Candida albicans strains in candidosis of different sites. Problemy meditsinskoy mikologii. 2007; 9 (1): 26–29 (in Russian).Куликов С.Н., Тюрин Ю.А., Фассахов Р.С. и др. Способ определения IgG-протеиназной активности. Патент РФ № 2373538, 2009. / Kulikov S.N., Tyurin Yu.A., Fassakhov R.S. et al. A method to measure proteinase activity. Patent RF № 2373538. 2009 (in Russian).Куликов С.Н., Тюрин Ю.А., Фассахов Р.С. и др. Способ определения IgG-протеиназной активности. Патент РФ № 2373538, 2009. / Kulikov S.N., Tyurin Yu.A., Fassakhov R.S. et al. A method to measure proteinase activity. Patent RF № 2373538. 2009 (in Russian).

The authors declare that there are no conflicts of interest present.